Mientras se están grabando las pistas principales no se puede a menos que lo hagas sacando el bus por unas salidas y volviendo a entrarlas por otras entradas de tu tarjeta.
Si solo estás reproduciendo, se puede hacer utilizando la función "Mix to file", pero no se puede asignar internamente, se creará un nuevo archivo con la mezcla que estés haciendo, cualquier modificación que hagas se grabará el el archivo final, lo que no se puede es ver esa mezcla en la pantalla hasta que has terminado y la cargas.
#1 amigo si se puede realizar incluso puedes armar un canal con efecto para tu voz y otro donde podras capturar ese audio con efectos en vivo y todo, no necesitas usar mix ni sub con simplemente un canal normal